ER2566 感受态细胞

ER2566 感受态细胞

产品规格:

ER2566	20×100μl
pUC19(control vector)	10pg/μl            10μl

F^- λ- fhuA2[lon] ompT lacZ::T7gene1 gal sulA11Δ(mcrC-mrr)114::IS10R(mcr-73::miniTn10-TetS)2 R(zgb-210::Tn10)(TetS) endA1 [dcm] High5^TM系列 ER2566感受态细胞为lon 和 ompT蛋白酶缺陷菌株。
膜外蛋白酶OMPT的缺失能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。
High5^TM系列 ER2566感受态细胞采用特殊化学试剂制作，可用于DNA的化学转化，经pUC19质粒检测转化效率达10⁸cfu/μg。
 

1.  取100μl冰上融化的ER2566感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

1.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

1.  感受态细胞最好在冰上融化。
2.  混入质粒时应轻柔操作。
3.  转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4.  诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。

5. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。

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