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SNU-398 于 1990 年由 J.-G. Park 及其同事取自一名韩国患者的间变性肝细胞癌 ，该患者已通过脂质体加多柔比星 和丝裂霉素-C 的组合进行了经导管动脉栓塞治疗。既可以附着细胞也可以悬浮细胞。悬浮的细胞是可行的 ，不应丢 弃。通过温和离心 (125 xg) 回收悬浮细胞 ，以与贴壁细胞群一起进行继代培养。

RPMI1640培养基；10%胎牛血清；1%双抗

SNU-387 于 1990 年由 J.-G. Park 及其同事取自一名韩国患者的原发性肝细胞癌 ，该患者接受了脂质体联合多柔比 星和丝裂霉素-C 的经导管动脉栓塞治疗

SNU-182由J.-G.Park及其同事于1989年从一名韩国患者的原发性肝细胞癌细胞毒治疗前获得

RPMI1640培养基；10%胎牛血清；1%双抗

细胞融合的方法很多，常用的有转动法和离心法。融合时脾细胞和骨髓瘤细胞的比例为1:1至10:1不等。3:1或5:1最为常用。

模板质量问题： 　　 　　1）模板提取不完整，其中不含你的目的基因，或目的基因含量太低。可以跑个电泳看看提取的DNA，PCR阳性样品与阴性样品是否有明显差别。如果确定是这种问题，可以增加模板量试试，但不一定行得通。 　　 　　2）模板里面残留某种试剂成份，可能抑制Taq聚合酶的活性，如果是这种情况，可以用试剂盒把模板再纯化一下，或将模板做个梯度稀释以确定最佳的模板量。 　　

感染预实验 　　 　　以 24 孔培养板为例，同时进行目的细胞和工具细胞的感染预实验。工具细胞可选择 293T（人胚肾上皮细胞）、H1299（人肺癌细胞）或其它细胞。实验材料：培养基、24 孔培养板，移液枪，枪头， EP 管，细胞计数板、冰盒、废液缸等。（根据目的细胞情况，可酌情使用 Polybrene） 　　

与Southern或Northern杂交方法类似，但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。既可以定性，又可以半定量的Western是初步鉴定蛋白质最方便也是最通用的方法。

准确性、均匀性和稳定性是标准物质量值的特性和基本要求。 　　 　　(1)准确性 　　 　　通常标准物质证书中会同时给出标准物质的标准值和计量的不确定度，不确定度的来源包括称量、仪器、均匀性、稳定性、不同实验室之间以及不同方法所产生的不确定度均需计算在内。

实验原理 细菌的芽胞具有厚而致密的壁，透性低，不易着色，若用一般染色法只能使菌体着色而芽胞不着色（芽孢呈无色透明状）。芽孢染色法就是根据芽孢既难以染色而一旦染上色后又难以脱色这一特点而设计的。所有的芽孢染色法都基于同一个原则：除了用着色力强的染料外，还需要加热，以促进芽孢着色。当染芽孢时，菌体也会着色，然后水洗，芽孢染上的颜色难以渗出，而菌体会脱色。然后用对比度强的染料对菌体复染，使菌体和芽孢呈现出不同的颜色，因而能更明显地衬托出芽孢，便于观察。

牛血清白蛋白是血液中的主要成分（38g/100ml），分子量68kD，等电点4.8，含氮量16%，含糖量0.08%，仅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。牛血清蛋白溶液可以作为测量蛋白质含量的标准曲线用。

酸碱滴定实验详细步骤： 1、把已知物质的量浓度的盐酸注入事先已用该盐酸溶液润洗过的酸式滴定管，至刻度“ 0”以上，把滴定管固定在滴定管夹上。轻轻转动下面的活塞，使管的尖嘴部分充满溶液且无气泡。然后调整管内液面，使其保持在“0”或“0”以下的某一刻度，并记下准确读数。 2、把待测浓度的NaOH溶液注入事先已用该溶液润洗过的碱式滴定管，也把它固定在滴定管夹上。轻轻挤压玻璃球，使管的尖嘴部分充满溶液且无气泡,然后调整管内液面，使其保持在“ 0”或“ 0”以下某一刻度，并记下准确读数。

原代细胞可用来转染siRNA、antisense RNA、microRNA 等 200bp 以内的小分子 RNA 和 DNA，可转染绝大多数原代细胞。目前，无论国外还是国内，原代细胞的核酸转染都是个热点难题，市场还缺乏真正有效的商品化的原代细胞核酸转染试剂。原代细胞能够高效转染绝大多数原代细胞，获得比较理想的基因敲除效果。甚至对一些活体寄生虫幼虫，也能获得较为理想的转染结果。对于大多数原代细胞，RFect PM 细胞转染阳性率都在 80%以上，而转染细胞死亡率不到 10%。

质粒载体的基本介绍 质粒是小型环状DNA分子，在基因工程中作为最常用，最简单的载体，必须包括三部分：遗传标记基因，复制区，目的基因。 质粒在所有的细菌类群中都可发现，它们是独立于细菌染色体外自我复制的DNA分子。

贴壁生长的细胞核悬浮生长的细胞都有很多种 　　 　　活体体内的细胞当离体置于体外培养时大多数均以贴壁方式生长，主要包括正常细胞和肿瘤细胞，比如成纤维细胞，骨骼组织（骨及软骨），心肌与平滑肌、肝、肺、肾、乳腺皮肤神经胶质细胞，内分泌细胞，黑色素细胞及各种肿瘤细胞等。 　　 　　少数细胞在体外培养是悬浮生长，包括一些取自血、脾或骨髓的培养细胞，尤其是血液白细胞以及癌肿细胞。

冻存原理 　　 　　当细胞所处温度低于0°C时，细胞脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶，冰晶的大小对细胞的影响是不同的，大冰晶容易造成细胞膜、细胞器的损伤和破裂，故造成复苏出来的细胞存活率、状态等与冻存前的状态相差甚远。因此，我们在冻存细胞的时候会采取两个措施，一加入低温保护剂，二，慢冻细胞

QGY-7703细胞是来自35岁女性的肝癌；QGY-7703细胞染色体数目变化大 ，异倍体多；免疫荧光间接法AFP阳性反 应 ，异体移植能力强。亚显微结构方面 ，QGY-7703细胞核与细胞质的比例高 ，大的多形核和多种细胞器亚显微结构 改变。QGY-7703细胞能在ConA作用下凝集 ，群体倍增时间约为20.5小时。用Northern Blot方法 ，未能检测到 QGY-7703细胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表达 ，该细胞有hela交叉污染

Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed =28807831). Originally thought to originate from a hepatocellular carcinoma.

Amelogenin X CSF1PO 7,11 D2S1338 19,22 D3S1358 17 D5S818 12 D6S1043 12 D7S820 10,11 D8S1179 11,14 D12S391 18 D13S317 12,13 D16S539 11 D18S51 15 D19S433 11,14 FGA 28 D21S11 31.2,32.2 Penta D 9,11 Penta E 8,11 TH01 7 TPOX 8,10 vWA 15