HE染色的实验步骤及注意事项
实验步骤:
(1)样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。
(2)样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。
(3)染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。
(4)分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。
(5)染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。
(6)吹干或自然晾干细胞 爬片后,中性树胶封片。
若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可。
776 人阅读发布时间:2024-11-15 11:22