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大肠杆菌（E.coli）重组蛋白表达技术经过多年的发展，相对于其他表达体系，算是非常成熟的一个体系。大肠杆菌蛋白表达系统主要有以下特点：遗传背景清楚；易于培养和控制；转化操作简单；表达水平高；成本低；周期短。本篇将对大肠杆菌重组蛋白表达系统的常见技术问题进行一一解答。

抗凝是用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固。能够阻止血液凝固的物质,称为抗凝剂或抗凝物质。检查项目不同，所用的也不同。 　　实验室常用抗凝剂的选择有以下几种，实验中最常出现的几个抗凝剂。

当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时，有阻碍溶液pH变化的作用，称为缓冲作用，这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液（如HOAc与NaOAc），弱碱及其盐的混合溶液（如NH3·H2O与NH4Cl）等都是缓冲溶液。

标准物质的定义 按照《国际通用计量学基本术语》和《国际标准化组织指南30》，标准物质有如下定义： 1、标准物质（Reference Material）（RM）具有一种或多种规定特性足够均匀且稳定的材料，已被确定其符合测量过程的预期用途。 2、有证标准物质（Certified Reference Material）（CRM）采用计量学上有效程序测定的一种或多种规定特性的标准物质/标准样品(RM)，并附有证书提供规定特性值及其不确定度和计量溯源性的陈述。

CFPAC-1是胰腺管腺癌细胞系 ，建自26岁白人男性囊性纤维变性（CF）的肝转移灶。 该细胞系表达囊性纤维变性跨 膜调节因子（CFTR）。 形态为上皮样且顶端微绒毛极化。该细胞表达胰腺管细胞特征性的细胞角蛋白和癌胚抗原。倍 增时间为30-32小时。 它是亚3倍体的细胞系 ，36％的细胞的染色体模式数为75。 该细胞传代至24代时在无胸腺小鼠 中致瘤

该细 胞来源于人胰腺癌病人腹水中的细胞裸鼠异种移植而产生的癌性腹水细胞； AsPC- 1细胞可以表达CEA、人 胰腺相 关抗原、人胰腺特异性抗原和黏蛋白。

SW 1990细胞是于1978年从胰腺外分泌腺的胰腺腺癌Ⅱ期患者的脾转移灶中建立的；据报道 ，SW 1990细胞的植板 率为29%

该细胞是1985年从一名64岁女性原发性胰腺癌的肝转移中建立；PA-TU-8988S 的姐妹细胞系

RD-ES 是一种上皮细胞系 ，分离自患有尤文氏肉瘤的 19 岁男性 White 的肱骨。细胞系 RD-ES 可用于癌症研究。

该细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤 ，角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、 中间 丝相关蛋白阳性

NP69 永生化人鼻咽上皮细胞系保留了正常鼻咽细胞的许多特征 ，包括角蛋白谱和对 TGF- β 的反应 ，同时具有在NPC 中观察到的许多遗传特征 (2)。NP69 细胞是非致瘤性的 ，并且表现出锚定依赖性生长 (2)。NP69 细胞系对于病毒相 关肿瘤发生机制的研究特别有用。

DMEM培养基；10%胎牛血清； 1%双抗

该细胞系是由A. Yunis等人于1975年从一名65岁的高加索男性获得的胰腺肿瘤组织中建立的。据报道 ，该细胞系倍增 时间约40小时 ，在软琼脂中的集落形成效率约19％ 。该细胞系对天冬酰胺酶敏感。

CCD 841 CoN细胞是拉伸的上皮样细胞 ，在培养中生长为扁平且杂乱无章的层。可以观察到一些圆形细胞堆积在附着 的群体上 ，碎片中等至重。CRL-1790 是一种正常的人类二倍体细胞系 ，因此它最终会衰老。人口倍增水平 (PDL) 信 息可在特定批次的分析证书上找到 ，并可在 ATCC 网站上找到。

MEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗

张氏肝细胞1954年从非恶性的人体组织中建立。广泛应用于病毒学、生化和恶性肿瘤相关的转移研究。 ATCC通过同 工酶分析、HeLA标记染色体和DNA指纹法分析 ，认为它的起源是HeLa细胞污染的。

BxPC-3细胞不表达囊肿性纤维化跨膜电导调节子(CFTR) ，CFTR阳性的细胞株是Capan-1。

该细胞是一株早幼粒细胞。 外周血白细胞来自一位患有急性粒-单核细胞白血病的36岁白人女性。 HL-60 自发分化， 丁酸盐、次黄嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、放线菌素D和视黄酸可以促进分化。 细胞 表现出吞噬活性 ，并对趋化刺激有响应。致癌基因myc表达阳性。

人乳腺细胞MCF 10A是一种非致瘤性上皮细胞系。上皮唾液酸粘蛋白(epithelial sialomucins) ，细胞角蛋白 (cytokeratins)和乳脂肪球抗原(milkfat globule antigen)阳性。MCF 10A在胶原蛋白中呈现三维生长 ，并在融合 时形成圆顶状形态。迄今为止 ，细胞未显示终末分化或衰老的迹象。该细胞系对胰岛素、糖皮质激素、霍乱肠毒素和 表皮生长因子(EGF)有响应。通过电子显微镜观察 ，该细胞呈现管腔导管细胞的特征 ，但不呈现肌上皮细胞的特征。培 养液中的钙含量对细胞的形态影响很大。

从一位非癌个体的正常人支气管上皮病理切片分离出上皮细胞。这些细胞用腺病毒12-SV40病毒杂交病毒感染并克 隆。 BEAS-2B细胞保留了对血清反应进行鳞关分化的能力 ，并有用于筛选诱导或影响分化及致癌的化学或生物制剂。 细胞角蛋白及SV40抗原染色阳性。