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肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是肿瘤治疗失败的重要因素之一，成为目前阻碍肿瘤治疗的绊脚石。因此，探索肿瘤细胞产生耐药的原因以及如何改善肿瘤细胞对化疗药物耐药仍是目前研究的热点和难点。肿瘤细胞耐药的产生是一个复杂的过程，它的机制广泛牵涉到药物代谢学、病理学、生理学等多个学科，这就决定了肿瘤细胞对化疗药物产生耐药的机制是复杂的，因此体外建立化疗药物耐药细胞株仍然是研究肿瘤细胞耐药机制的重要方法。一种药物长期作用于某类细胞，杀死其中没有抗性的细胞，而对这类细胞中具有抗性的细胞不能杀死，即进行了选择。具有抗性的细胞大量繁殖产生很多抗性后代，但再用这种药物时表现出的药效大大下降的现象就是细胞的耐药性，采用体外低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击方法诱导肿瘤细胞对特定药物产生耐药性，从而构建出对特定药物产生耐药性的肿瘤细胞株。

霉菌生长繁殖主要的条件之一是必须保持一定的水份，一般来说，米麦类水份在14%以下， 大豆类在11%以下，干菜和干果品在30%以下，微生物是较难生长的。食品中真正能被微生物利用的那部分水份又称为水份活性（Wateractivity缩写为Aw），Aw越接近于1，微生物最易生长繁殖。食品中的Aw为0.98时。微生物最易生长繁殖，当Aw降为0.93以下时，微生物繁殖受到抑制，但霉菌仍能生长，当Aw在0.7以下时，则霉菌的繁殖受到抑制，可以阻止产毒的 霉菌繁殖。

如何去除霉菌 　　无论你住在哪儿，霉菌都是让人棘手的存在。有时候你能看见它们，有时候你看不见。有时候它们是黑色的（mold），有时候是白色的（mildew）。虽然你可以购买抗霉菌产品，但家里本来就有的家居用品就算达不到更好的效果，也同样能去除霉菌。这里有如何消灭霉菌并防止它们再次滋生的指南。

在实验室的监控项目中，不同实验室对温湿度都有要求，而大部分实验都是在明确的温湿度环境中展开，实验室环境条件直接影响着各种实验或检测的结果，每项实验的进行都需要精确可靠的监测仪器来提供准确的环境参数数据。此外，实验室温湿度等因素不仅有可能会造成设备性能的不稳定，甚至直接影响着仪器设备的使用寿命，因此，实验室温度的高低也是实验室管理的重要一环。实验室需要合适的温度和湿度。室内小气候，包括气温、湿度、气流速度等。对在实验室工作的人员和设备有影响。夏季适宜温度18~28℃，冬季适宜温度16~20℃，适宜湿度在30%~80%之间。除特殊实验室外，温湿度对大多数理化实验影响不大，但天平室和精密仪器室应根据需要控制温湿度。

为了保障结果的准确，实验室里的每个实验都会安排空白实验：运输空白、采样空白、试剂空白、全程空白等等，如此多的空白，你知道每个空白的意义和操作吗？

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。  基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1 2：BL21(DE3) 菌株  该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体（如pET系列）的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型：F-，ompT，hsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3） 3：BL21(DE3) pLysS菌株  该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。 基因型：F-，ompThsdS（rBB-mB－），gal，dcm（DE3，pLysS，Camr 4：JM109菌株  该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α－互补，从而显示β－半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株 

细胞荧光标记是利用荧光蛋白或荧光素酶报告基因作为标志物对研究细胞进行标记的分析方法,常用的荧光蛋白为绿色荧光蛋白（GFP）和红色荧光蛋白（RFP）两种。这些标志物通过转基因技术构建到载体上，可跟踪和判断生物细胞的分子变化。

在我们日常的检测工作和进行的某些实验中，经常会遇到需要预估细菌悬液的细菌浓度这样的问题，又是后我们需要精确计数菌液浓度，会用到血球计数板来进行计数；但有时我们只需要一个比较粗略的估计值即可，这里我推荐大家使用麦氏比浊法。 　　麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。具体的配制方法是根据硫酸和氯/化钡的比例来定的，有表可查，这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同，且都有定值。麦氏比浊管的配比如下：

纯水在25℃时pH值为7.0，但只要与空气接触一段时间，因为吸收二氧化碳而使pH值降到5.5左右。1滴浓盐酸(约12.4mol·L-1)加入1升纯水中，可使[H+]增加5000倍左右(由1.0×10-7增至5×10-4mol·L-1)，若将1滴氢氧/化钠溶液(12.4mol·L-1)加到1升纯水中，pH变化也有3个单位。可见纯水的pH值因加入少量的强酸或强碱而发生很大变化。然而，1滴浓盐酸加入到1升HOAc-NaOAc混合溶液或NaH2PO4-Na2HPO4混合溶液中，[H+]的增加不到百分之一(从1.00×10-7增至1.01×10-7mol·L-1)，pH值没有明显变化。这种能对抗外来少量强酸\强碱或稍加稀释不引起溶液pH值发生明显变化的作用叫做缓冲作用；具有缓冲作用的溶液，叫做缓冲溶液。

化学试剂是进行化学研究、成分分析的相对标准物质，是化学实验重要的消耗性物资，广泛用于物质的合成、分离、定性和定量分析。试剂的有效日期是影响实验结果准确性的重要因素。 在实际使用过程中，人们总是习惯于用生产日期来判断化学试剂的有效性，其实这是不对的。化学试剂不像食品和药品有严格的保质期，化学试剂一般没有保质期的具体要求和界限，这与化学试剂的保质期受多方面因素影响有关，要根据化学性质、保存条件等，再结合工作的实际情况判断试剂是否出现变质、能否继续使用。

实验室工作人员在工作中可能会接触或使用化学试剂，其中一些化学试剂不仅对工作人员健康有很大Σ害，还可能造成重大安全事故。因此，应加强实验室化学试剂的安全管理。

实验室化学试剂有没有保质期，怎么办？实验室试剂为啥会变质，搞不懂？怎么样才能延长它的保质期，我不会？是不是一头雾水，肿么办？不要慌！带你了解其中奥妙，保证你一看就懂~ 要做到合理保管，一要了解试剂结构与性质间关系，二要创造适应试剂贮存的外部环境。

液体溶液配制可以说是实验室分析人员最基础的一门技术，也是每天工作中的必选项。液体溶液的配置包括溶质的计算、移液、定容等基础操作，还包括一些混合溶液的前后加入顺序及利用一些试剂自身的化学性质，掌握了溶液配制的技巧，可以大大缩短配置时间，提高实验效率。 我们都知道，溶液是由至少两种物质组成的均一、稳定的混合物，被分散的物质（溶质）以分子或更小的质点分散于另一物质（溶剂）中。溶液是混合物。种类分为：一般溶液和标准溶液。物质在常温时有固体、液体和气体三种状态。因此溶液也有三种状态，大气本身就是一种气体溶液，固体溶液混合物常称固溶体，如合金。一般溶液只是专指液体溶液。液体溶液包括两种，即能够导电的电解质溶液和不能导电的非电解质溶液。

酸式滴定管的玻璃活塞是固定配合该滴定管的，所以不能任意更换。要注意玻塞是否旋转自如，通常是取出活塞，拭干，在活塞两端沿圆周抹一薄层凡士林作润滑剂（或真空活塞油脂），然后将活塞插入，顶紧，旋转几下使凡士林分布均匀（几乎透明）即可，再在活塞β端套一橡皮圈，使之固定。注意凡士林不要涂得太多，否则易使活塞中的小孔或滴定管下端管尖堵塞。在使用前应试?。一般的滴定液均可用酸式滴定管，但因碱性滴定液常使玻塞与玻孔粘合，以至难以转动，故碱性滴定液宜用碱式滴定管。但碱性滴定液只要使用时间不长，用毕后立即用水冲洗，亦可使用酸式滴定管。

样品前处理是指样品的制备和对样品中的待测组分进行提取、净化和浓缩的过程。样品前处理的目的是消除基质干扰、保护仪器、提高检测方法灵敏度、选择性、准确度、精密度。 在食品检测领域，对食品进行预处理是至关重要的，其原因如下： （1）食品大多数为天然化合物故所含成分复杂； （2） 目标化合物限量标准越来越严格，对检测限要求也越来越低； （3） 一些待测物与食品中所含其它成分相似，容易出现假阳性现象； （4） 各目标化合物的性质如极性、沸点、热稳定性等差异较大； （5） 可能存在多种有害的待测组分，会对人类身体伤害产生协同作用。例如di氏剂、DDT等农药与多联/苯共同存在时，会使毒性增加一倍，因此各国十分注重食品中多组分Σ害残留物质现场调查。 （3）解决办法 对于一些易代谢的药物，如磺胺类、聚醚类、同化激素等，它们不宜长期储存，理想的冷藏温度为零下40℃-80℃。 为防止某些样品中的被测物被所含的ø进一步分解代谢，需要立即终止ø的活性，主要方法有液氮中快速冷却、微波照射、匀浆及沉淀和加入ø活性抑制剂，（通常会加入氟/化钠）。 对于一些易被氧化的物质如儿茶酚类中的阿扑ma啡，其具有邻苯/二酚的结构，被氧化后易产生醌类杂质。其在零下15℃时仅能保存4周，但加入抗坏血酸后可保存10周。 （4）对存储器皿的要求 当采用玻璃器皿进行储藏容器时要注意温度骤降后玻璃器皿是否会被冻裂。对于某些碱性较强的物质会吸附在玻璃表面故。因此必要时要对玻璃器皿进行硅/烷化处理。塑料器皿可以满足以上要求，但是其可能会含有高沸点的增塑剂，可能释放到样品瓶中造成污染，而且还会吸附某些药物，增大实验误差。以上两种储存容器均有其优缺点，具体选择可根据实验要求，并在整个实验过程中做空白实验，当实验失败时可及时查找原因。

微生物的生长，除了受本身的遗传特性决定外，还受到许多外界因素的影响，如营养物浓度、温度、水分、氧气、pH等。微生物的种类不同，培养的方式和条件也不尽相同。 影响微生物生长的因素很多，简要介绍如下： （1）水分 水分是微生物实验室培养中进行生长的必要条件。芽孢、孢子萌发，首先需要水分。 微生物是不能脱离水而生存的。但是微生物只能在水溶液中生长，而不能生活在纯水中。各种微生物在不能生长发育的水分活性范Χ内，均具有狭小的适当的水分活性区域。

培养基制备规程 1.目的 规范本中心微生物实验室培养基制备工作，保证培养基的质量。 2.适用范Χ 本规程适用于使用商品化干粉培养基制备各种待用培养基。 3.职责 3.1培养基制备人员负责按本规程制备各类培养基，及时填写成品培养基制备记，编制培养基目，粘贴标签。 3.2 科室负责人：负责指导、监督检验人员按规程制备培养基。

　一、称量错误 　　天平称量不准确、计算称量错误导致配制培养基的浓度不正确，都有可能导致岀现部分沉淀。 　　二、水质不佳 　　多数培养基的制备需要使用纯化水、去离子水配制，而天然水中含有含有较多的矿物盐离子，若错误的使用了自来水，矿泉水配制，或使用的纯化水离子δ除净，都有可能导致培养基灭菌后岀现浑浊现象或沉淀（磷酸盐含量高的培养基更易出现此类问题。

贮存环境：贮存室应尽量设置空调设施，保证室内阴凉、干燥、避光、通风，温度在25±5℃，相对湿度在50%～75%为宜。特殊品种要求严格按照规定的贮存条件妥善保存。 　　标准品应放在干燥器或其它适宜容器中保存，每一个干燥器或容器外应有区别于标准品编号的特殊编码，以示存放位置。干燥器置于专用的柜中，依次排列整齐，并由专人管理。 　　标准品的贮存期：一般按标准品的规定贮存期限执行，没有期限的原则上化学提纯物标准品为3年，生物试剂和不稳定的以6～12个月为宜。 　　标准品贮存应由管理员每天上下午各检查1次温度、湿度并做记录。凡不符合规定要求的，应及时调整纠正。多雨季节时，保管员要增加检查频次。

标准品的标定主要有两个流程，一是初步标定，二是正式标定。远慕生物针对标准品的标定结果做出总结，下面我们一起来看，处理标准品的标定结果请遵循这四个步骤： 第一：如该药物没有可进行等当量换算并符合要求的容量法时，可采用反复纯化的原料，色谱法确定纯度后扣除有关物质、炽灼残渣、水分和挥发溶剂等后的理论含量确定为标准品含量，以此为基准进行对照品(标准品)的换代和量值传递。 第二：用于抗生素微生物检定法的代基准标准品可参照上述方法标定，如为多组份抗生素，其组份比例应与拟上市产品组份比例一致或接近，或以其中某一组份纯品为基准标准品，但要注意标准品换代时量值传递的恒定。 第三：仅用于鉴别定性的化学对照品，注重其结构确证的研究资料，纯度和含量的要求一般可适当降低。 第四：杂质对照品，用作限度要求时，应提供其来源(合成路线)、结构确证的研究资料，应具备较高的纯度和含量，并提供纯度和含量的的测定结果，提供质量控制标准。