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　琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。 　　 　　琼脂糖凝胶约可区分相差100bp的DNA－－片段，其分辨率虽比聚丙烯酰胺凝胶低，但它制备容易，分离范围广，尤其适于分离大片段DNA。普通琼脂糖凝胶分离DNA的范围为0.2-20kb，利用脉冲电泳，可分离高达10^7bp的DNA－－片段。

　研究实验中，我们常常用到一个高大上的仪器――流式细胞仪，而与之相对应的就是流式细胞术，可是大家对它们都了解多少呢？今天就带着大家好好地认识一下。

　单克隆抗体的优点与局限性：单克隆抗体和多克隆抗体各有其优点和局限性，只有对它们有全面的了解，才能根据不同应用领域的要求，正确的选择和应用。 　　 　　一、单克隆抗体 　　 　　单克隆抗体的定义: 　　 　　单克隆抗体是仅与目标蛋白某一特定表位结合的单一抗体。

标准溶液是化学实验室用于分析工作的标准试剂的总称，标准滴定溶液是确定了准确浓度用于滴定分析的一种溶液。如何制备标准滴定溶液并保证其浓度的准确性是保证试样分析结果准确性的基础。

从物品、用品消毒灭菌着手 　　 　　细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时，在无菌过滤操作中，随着滤过体积的增大，滤膜破损的可能性增加，故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作：75%的酒精搽拭培养箱后，使用可移动的紫外灯至少消毒 30min，加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制300ml的饱和硫酸铜加3L灭菌超纯水混合成硫酸铜溶液加入水槽中。

　实验方法原理：本染色法是最基本的染色法，可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。

冻存细胞与新鲜细胞的RNA提取在原理上并没有显著的区别，两者都可以采用类似的方法进行RNA的提取。以下是关于两者RNA提取的详细比较： 一、操作步骤相似性 1.细胞裂解：无论是冻存细胞还是新鲜细胞，都需要通过细胞裂解来释放细胞内的RNA。这通常使用裂解缓冲液来破坏细胞膜和细胞核，使RNA能够被释放出来。 2.RNA的释放：在细胞裂解的过程中，RNA会被释放到裂解液中。为保持RNA的完整性，应避免使用酶来降解RNA，并控制温度和pH值。

抗酸染色的基本原理： 分枝杆菌的植物细胞内带有很多的脂类，包围着在肽聚糖的外边，因此分枝杆菌一般不容易上色，要历经加温和增加上色时间来促进其上色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染剂融合后，就难以被酸碱性脱色剂褪色，故称抗酸染色。 齐-尼氏抗酸染色法是在加温标准下使分枝菌酸与石/炭酸复红坚固融合成一氧化氮合酶，用盐酸乙醇解决都不褪色。当再加偏碱美兰复染后，分枝杆菌依然为鲜红色，而别的病菌及情况中的物质为深蓝色。

多克隆抗体（polyclonal antibody, pAb）：用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物，可刺激机体多个B细胞克隆，产生针对多种抗原表位的不同抗体。所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物，即多克隆抗体。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤（hybridoma）抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。

融合剂 细胞融合的方法有物理法，如电融合、激光融合，化学融合法和生物融合法，如灭活的仙台病毒，此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。聚乙二醇（PEG），在分子量为200～700时，呈无色、无臭的粘稠状液体，分子量大于1000时，呈乳白色蜡状固体，能溶于水、乙醇及其他许多有机溶剂，对热稳定，与许多化学药品不起作用。用作细胞融合剂的聚乙二醇一般选用分子量为4000者，常用浓度为50%，pH8.0～pH8.2（用10%NaHCO3调整），分子量小的PEG，融合效应差，又有毒性，分子量过大，则粘性太大，不易操作。50%浓度，pH偏碱时融合效应最高。也有采用30%～50%浓度的PEG加上10%二甲亚砜。不同批号的PEG，即使分子量相同，但融合率却有明显差异，选用时必须注意。每批都必须进行细胞毒性试验后方可应用。要买高纯度的，一般选供气相色谱用的PEG。

双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下： 　　 　　一、将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。 　　 　　二、加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。

培养基与菌种分离是从含有多种微生物的样品中获得纯种微生物的操作技术。菌种分离主要在培养皿上进行，常用的方法是稀释法和划线法。使用这两种方法的目的是是微生物的一个个体通过繁殖，在固体培养基上长出肉眼能见的群体，根据培养特征，用接种针调取所需菌种并在显微镜下检查，证明为单一形状的菌体。常用的培养基是选择培养基。

甘油菌种复苏保存涉及几个关键步骤，‌包括菌种的保存、‌复苏以及再次保存的过程。‌

核糖核酸酶A（RNase A）来源于牛胰脏，是一种内切核糖核酸酶，可特异攻击RNA上嘧啶残基的3’端，切割胞嘧啶或尿嘧啶与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键，反应终产物是3’嘧啶核苷酸和末端带3’嘧啶核苷酸的寡核苷酸。无辅助因子及二价阳离子存在时，核糖核酸酶A的作用可以被胎盘RNA酶抑制剂（RNasin）或氧钒一核糖核苷复合物（vanadyl—ribonuclosidecomplex，VRC）所抑制。RNase A的反应条件极广，且极难失活。在低盐浓度（0～100 mmol/l NaCl）下，RNase A切割单链和双链RNA、DNA：RNA杂交体中的RNA；当NaCl浓度为300 mmol/l。或更高时，RNase A就特异性切割单链RNA。去除反应液中的RNase A，通常需要蛋白酶K处理、酚反复抽提和乙醇沉淀。

磁珠法核酸提取试剂盒原理是通过特殊条件快速裂解样本，并利用磁珠颗粒特异性吸附核酸，经过洗涤和洗脱，达到快速分离核酸的目的。试剂盒提取效率高，性能稳定，提取纯化的核酸可用于酶切、反录、PCR、 RI-PCR、 Southern blot等各种常见下游实验。 磁珠法核酸提取试剂盒目前主要被用于多种类型的生物样本中病毒核酸的提取、富集、纯化步骤，其处理后的产物用于临床体外检测使用。

简介 该细胞系源自一位患有横纹肌肉瘤的1岁女孩的肌肉组织 ，由D.J.Giard建立。

简介 A- 375细胞源自一位54岁女性 ，是由D· J· Giard等人建立的一系列细胞株中的一株。A- 375细胞在抗胸腺细 胞球蛋白、血清处理的NIH瑞士小鼠中形成类似于恶性黑素瘤的快速增长的皮下肿瘤； A- 375在普通成纤维细 胞和琼脂上形 成克隆。

背景描述 MNT-1 is a cell line exhibiting fibroblast morphology that was isolated from the lymph node of a patient with melanoma. This cell line is useful for studies of melanosome properties, melanosome biogenesis formation, influences on pigmentation in humans, and membrane trafficking.

完全培养基配置 DMEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗

完全培养基配置 DMEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗 形态 上皮细胞样