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凝胶层析分离物质的优缺点   1.凝胶层析操作简便，所需设备简单。有时只要有一根层析柱便可进行工作。分离介质—凝胶完全不需要像离子交换剂那样复杂的再生过程便可重复使用。   2.分离效果较好，重复性高。最突出的是样品回收率高，接近100%。   3.分离条件缓和。凝胶骨架亲水，分离过程又不涉及化学键的变化，所以对分离物的活性没有不良影响。

昆虫表达体系是四大蛋白表达系统（原核细胞，酵母，昆虫细胞，真核哺乳动物表达体系）之一。昆虫表达系统的原理是通过将转移载体中的表达组件转座到大肠杆菌中增殖的杆状病毒穿梭载体上，提取穿梭质粒DNA转染昆虫细胞后，得到的子代病毒即为重组病毒。将病毒上清侵染昆虫细胞，获得表达的重组蛋白。

Product Format: a 15 ml centrifuge tube Culture Properties：悬浮 Complete Growth Medium: 89%IMDM+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Product Format: a T25 flask Culture Properties：贴壁 Complete Growth Medium: 89%1640+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Product Format: a T25 flask Culture Properties：贴壁 Complete Growth Medium: 89%1640+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Product Format: a T25 flask Culture Properties：贴壁 Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Product Format: a T25 flask Culture Properties：贴壁 Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Product Format: a T25 flask Culture Properties：贴壁 Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Product Format: a T25 flask Culture Properties：贴壁 Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Product Format: a T25 flask Culture Properties：贴壁 Complete Growth Medium: 89%McCOY's 5A+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Product Format: a T25 flask Culture Properties：贴壁 Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Product Format: a T25 flaskCulture Properties：贴壁Complete Growth Medium: 89%1640+10%FBS+1%双抗Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%Application: Cells and cancer researchNOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

昆虫细胞是主要提取来自昆虫的一类真核细胞。通过培养制造宿主的病毒，可以引起昆虫流行病，但对人畜和植物无害，因而可作病毒杀虫剂，还可以生产某些药用蛋白。细胞培养瓶是培养昆虫细胞常用的一种细胞培养耗材，那么在培养昆虫细胞时需要注意哪些问题呢？

HPLC全称是High Performance Liquid Chromatography（高效液相色谱法），又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。世界上约有80%的有机化合物可以用HPLC来分析测定。HPLC检测方法，因对含有众多成分的复杂体系具有强大的分离功能，且分析速度快，其重现性和准确度优于薄层色谱法。是中药及其制剂含量测定的首/选方法，中国药典大多采用 HPLC 进行含量测定。

实验方法原理 当重组病毒通过噬斑纯化和扩增后，免疫印迹可用于鉴定重组蛋白，并检测其是否有预期的大小以及是否从感染细胞中分泌。下面的步骤是介绍检测非分泌性（细胞内）蛋白的，如果重组蛋白是分泌到培养基中的，可按注解中的步骤操作。 实验材料 生长至汇片的单层 BS-C-1 细胞重组痘苗病毒储液 试剂、试剂盒 完全 MEM-5 培养基胰酶细胞裂解液5 × SDS 样品缓冲液 仪器、耗材 6 孔组织培养板Sorvall 离心机95℃ 水浴锅

细胞裂解液各成分的作用： 1、第一种50mmol/L Tris-HCl是缓冲液，保证细胞裂解时PH值也能稳定，Tris是一种有机碱。 2、第二种1.0 mmol/L EDTA是一种金属螯合剂。 3、第三种150 mmol/L NaCl是等渗体系电解质，用于协调细胞膜内外离子平衡。 4、第四种0.1% SDS是十二烷基硫酸钠，是一种表面活性剂和还原剂，有增溶作用。

动物细胞融合也称细胞杂交（cell hybridization），是指两个或多个动物细胞融合成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞（hybrid cell）。   诱导细胞融合的方法有三种：生物方法（病毒）、化学方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（离心，震动，电刺激）。某些病毒如：仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒的被膜中有融合蛋白（fusion protein），可介导病毒同宿主细胞融合，也可介导细胞与细胞的融合，因此可以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合。化学和物理方法可造成膜脂分子排列的改变，去掉作用因素之后，质膜恢复原有的有序结构，在恢复过程中便可诱导相接触的细胞发生融合。

一、 细胞融合的方法有三种：生物方法、化学方法、物理方法。 二、细胞融合也称细胞杂交,是指细胞通过介导和培养,在离体条件下用人工方法将不同种的细胞通过无性方式融合(合并)成一个核或多核的杂合细胞的过程。体细胞融合后可形成四倍体或多倍体细胞，由此形成的杂交细胞，其特性会有很大的变化。

1. 细胞株取材要求新鲜，无菌，解剖小鼠时，注意不要损伤脾脏及其周围的脏器，尤其是肠道等，防止污染脾脏。 2. 冲洗脾脏时要尽量洗净血污，去除无用组织，并要防止组织干燥。 3. 碾磨后及时用清水冲洗筛网，防止组织、细胞阻塞网孔。 4. 计数前，注意xi尽平皿里的细胞，充分混匀，使细胞分散成单个细胞。 5. 实验操作应在操作台*无菌区域内进行，勿在边缘非无菌区域操作。 6. 金属器械不能在火焰中烧的时间过长，烧过的金属镊要待冷却后才能挟取组织，以免造成组织损伤。

在所有的细胞离体培养中，困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。 ⑴血清:动物细胞离体培养常常需要血清。常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。有一天人们真正学会了配制和血清一样的培养液，那时血清才可被取代。在这里，血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。 ⑵支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃，高速冷冻离心机，塑料等作为支持物。 ⑶气体交换:二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节，不断维持所需要的气体条件，每一次开箱操作后的快速恢复对设备的要求可想而知有多难?由此决定了动物细胞离体培养设备要求高、投资大。