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基因型：Ach5 (Rif R ) Ti pAL4404 (StrR ), Octopine type 产品说明： LBA4404菌株为农杆菌Ach5型背景(Hoekema et al., 1983)，核基因中含有利福平抗性基因(Rif)。此菌株还携 带一种自身转运功能丧失的质粒(disarmed Ti plasmid)，LBA4404菌株含有章鱼碱型Ti质粒pAL4404，该质粒含 有vir基因（vir基因是TDNA插入植物基因组所必需的元件，pAL4404质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可 辅助植物双元表达载体的T-DNA的转移）。pAL4404质粒含有链霉素抗性(Str)，赋予LBA4404菌株链霉素抗性。 LBA4404农杆菌适用于番茄、烟草等植物的转基因操作。LBA4404电转感受态特别适用大质粒的转化，经 pCAMBIA2301质粒检测转化效率大于10 5 cfu/μg DNA。

基因型：C58 (rifR ) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) (StrR /GentR ), Nopaline type 产品介绍： GV3101菌株为农杆菌C58型背景，核基因中含有利福平抗性基因Rif。此菌株还携带一种自身转运功能丧 失的质粒(disarmed Ti plasmid)。GV3101菌株含有pMP90 (pTiC58DT-DNA)，该质粒含有vir基因（vir基因是 TDNA 插入植物基因组所必需的元件，pMP90 (pTiC58DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可 辅助植物双 元表达载体的T-DNA的转移）。pMP90 (pTiC58DT-DNA)质粒还含有Str和Gent抗性基因，赋予 GV3101菌株链 霉素和庆大霉素抗性。GV3101农杆菌适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操 作。GV3101 电转 感受态特别适用于大质粒的转化，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率大于10 5 cfu/μg DNA。

基因型：C58 (RifR ) Ti pEHA105 (pTiBo542DT-DNA) (StrR ), Succinamopine type 产品说明： EHA105由EHA101菌株改造而来(Hood et al., 1993)，为农杆菌C58型背景，核基因中含有利福平抗性基因 (Rif)。此菌株还携带一种自身转运功能丧失的质粒(disarmed Ti plasmid)。EHA105菌株含有胭脂碱型Ti质粒 pEHA105 (pTiBo542DT-DNA),该质粒含有vir基因(vir基因是TDNA插入植物基因组所必需的元件，pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可辅助植物双元表达载体的T-DNA的转移）。 pEHA105 (pTiBo542DT-DNA)质粒还含有Str抗性基因，赋予EHA105菌株链霉素抗性。EHA105农杆菌适用于水 稻、烟草等植物的转基因操作。EHA105电转感受态特别适用于大质粒的转化，经pCAMBIA2301质粒检测转化 效率大于10 5 cfu/μg DNA。

基因型：C58RecA (Rif R /Carb R ) TipTiBo542DT-DNA(StrR ) ,Succinamopine type 产品说明： AGL1菌株为农杆菌C58, RecA型背景(Lazoet al.,1991)，核基因中含有利福平抗性基因(Rif)和羧苄青霉素抗 性基因(Carb)。此菌株还携带一种自身转运功能丧失的质粒(disarmed Ti plasmid)，AGL1菌株含有琥珀碱型Ti 质粒pAGL0(pTiBo542DT-DNA)，该质粒含有vir基因（vir基因是T-DNA插入植物基因组所必需的元件， pAGL0(pTiBo542DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可辅助植物双元表达载体的T-DNA的转移）。 pAGL0(pTiBo542DT-DNA)质粒还含有Str抗性基因，赋予AGL1菌株链霉素抗性。AGL1农杆菌适用于水稻、拟 南芥、杨树等植物的转基因操作。AGL1电转感受态特别适用大质粒的转化，经pCAMBIA2301质粒检测转化效 率大于10 5 cfu/μg DNA。

实验原理 凝胶层析又称排阻层析，凝胶过滤，渗透层析或分子筛层析等。它广泛地应用于分离、提纯、浓缩生物大分子及脱盐、去热源等，而测定蛋白质的分子量也是它的重要应用之一。凝胶是一种具有立体网状结构且呈多孔的不溶性珠状颗粒物质。用它来分离物质，主要是根据多孔凝胶对不同半径的蛋白质分子（近于球形）具有不同的排阻效应实现的。亦即它是根据分子大小这一物理性质进行分离纯化的。对于某种型号的凝胶，一些大分子不能进入凝胶颗粒内部而完全被排阻在外，只能沿着颗粒间的缝隙流出柱外；而一些小分子不被排阻，可自由扩散，渗透进入凝胶内部的筛孔，尔后又被流出的洗脱液带走。分子越小，进入凝胶内部越深，所走的路程越多，故小分子最后流出柱外，而大分子先从柱中流出。一些中等大小的分子介于大分子与小分子之间，只能进入一部分凝胶较大的孔隙，亦即部分排阻，因此这些分子从柱中流出的顺序也介于大、小分子之间。这样样品经过凝胶层析后，分子便按照从大到小的顺序依次流出，达到分离的目的。

RNA酶保护法是一种全新的mRNA定量分析方法。其基本原理是将标记的特异RNA探针（32P或生物素）与待测的RNA样品液相杂交，标记的特异RNA探针按碱基互补的原则与目的基因特异性结合，形成双链RNA；未结合的单链RNA经RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸，而待测目的基因与特异RNA探针结合后形成双链RNA，免受RNA酶的消化，故该方法命名为RNA酶保护实验。

载体结合法 　　载体结合法是指将酶固定到非水溶性载体上的方法。根据固定方式的不同，这种方法又可以分为物理吸附法、离子结合法和共价结合法。物理吸附法是指将酶吸附到固体吸附剂表面的方法，固体吸附剂多为活性炭和多孔玻璃等。离子结合法是指通过离子键将酶结合到具有离子交换基团的非水溶性载体上的方法，载体有离子交换树脂等。共价结合法是指酶和载体以共价键的形式结合在一起的方法，这种方法需要酶和载体都具有氨基、羧基或羟基等官能团。

在微生物检验过程中，测定菌落的总数可以分析菌落的繁殖和生长情况。随着食品安全问题的突出，检测结果准确无误也是确保食品安全的基石。但是，在食品菌落总数检测中数据不准确的现象时有发生，问题主要出在哪里呢？ 　　菌落总数在我国许多产品标准中有明确的限量规定，其中在GB 4789.2-2016《食品安全国家 标准食品微生物学检验菌落总数测定》（以下简称GB 4789.2）中就规定了食品中菌落总数的具体流程。

1、药品中污染的微生物处于不稳定状态，微生物种类具有不确定性； 2、在药品生产各个环节中, 微生物污染存在着不均匀性； 3、无论是无抑菌性药物还是抑菌性药物都要进行微生物限度检查，特别是污染于抑菌药物中的微生物在一定条件下可以稳定存在一段时间，虽然它们可能受到损伤，但未死亡，如服用至人体内, 当条件适宜时仍可生长繁殖。 4、某些药物在试验条件下呈现抑菌作用并干扰待检菌的检出或计数, 但当服用后受到胃液及肠液的稀释, 抑菌作用减弱或直接静脉注射入血液, 细菌便可复苏并繁殖, 对人体造成危害。

微生物在自然界中呈混杂状态存在，要获得所需菌种，必需从中把它们分离出来。在保存菌种时不慎受到到污染也需予以分纯。微生物分离和纯化的方法很多，但基本原理却是相似的，即将待分离的样品进行一定的稀释，并使微生物的细胞（或孢子）尽量以分散状态存在，然后使其长成一个个纯种单菌落。然而上述工作又离不开接种，即将一种微生物移到另一灭过菌的培养基上的过程。

抗原抗体反应是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。这种反应既可在机体内进行，也可以在机体外进行。抗原抗体反应的过程是经过一系列的化学和物理变化，包括抗原抗体特异性结合和非特异性促凝聚两个阶段，以及由亲水胶体转为疏水胶体的变化。 由于抗体主要存在于血清中，在抗原或抗体检测中多以血清为试验材料，故将体外抗原抗体的免疫学反应也称作血清学反应(serological reaction)。该反应既可用已知的抗原检测未知的抗体，这是临床上常用的血清学诊断方法；也可用已知的抗体检测未知的抗原，如微生物及其代谢产物、激素、药物鉴定等的检测

初次应答 抗原初次进入机体后，经一定的潜伏期才能产生浆细胞并合成和分泌抗体。在潜伏期，抗原被识别和加工，此期的特征是细胞增殖与分化，持续的时间与抗原的性质及进入机体的途径有关，例如菌苗经5-9d，血液中就有抗菌抗体出现；而类毒素则需2-3周后才合成抗毒素。潜伏期之后，抗体浓度呈对数增长，进入对数增长期。继而经历了稳定状态和衰退期，抗体水平迅速降低。上述各期的持续时间长短都与抗原性质有密切关系。 一般来讲，初次应答所产生的抗体量不多，持续时间也短。td抗原刺激机体可产生数种类型的免疫球蛋白，如在预防接种或自然感染后，最后出现的是igm，其消失也快，在血中字持续数周至数日。其次出现的是igg，在igm接近消失时，igg达高峰阶段，在血中持续时间较长。iga出现最晚，常在igm和igg出现两周以至1-2月后才能在血中测出，其含量也低，但持续时间亦较长。

固体试剂一般用牛角匙或塑料匙取用，牛角匙或塑料匙的两端分别为大小两个匙，且随匙柄的长度不同，匙的大小也随着变化，长的匙大，短的匙小。 　　取用试剂时，牛角匙或塑料匙必须洗净擦干才能用，以免沾污试剂。最好每种试剂设置一个专用牛角匙或塑料匙。 　　取用试剂时，一般是用多少取多少，取好后立即把瓶盖盖严，需要蜡封的，必须立即重新蜡封，随手将试剂瓶放回原处，以免搞错位置被人误用或因查找而造成时间浪费。 　　若要求称取一定量的固体试剂时，可先在台秤盘上放纸或表面皿，使台秤平衡，然后将固体试剂放在纸上或表面皿上称量。易潮解或有腐蚀性的物质可将纸改成用烧杯或锥形瓶称量。 若要求准确称取一定重量的固体试剂作基准物或配制溶液，一般采用减量法或固定重量法在分析天平上称量。

培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物的试验结果，而pH值又是培养基的重要监控项目。这是因为微生物的生长不仅依赖丰富的营养，还需要一个适宜的pH环境，只有在适宜的pH环境下微生物才能正常生长繁殖或体现其生物特性，因此培养基pH值是否符合要求直接影响微生物检验结果。在培养基配制过程中，灭菌过程对培养基pH值影响尤为重要。我们常常可以发现，培养基在灭菌前后pH值有差异，一般灭菌后pH值都会有所下降，这是为什么呢？

标准曲线是标准物质的物理/化学属性跟仪器响应之间的函数关系。建立标准曲线的目的是推导待测物质的理化属性。在分析化学实验中，常用标准曲线法进行定量分析，通常情况下的标准工作曲线是一条直线。

样品的采集 采样：从大量的分析对象种抽去有代表性的一部分样品作为分析材料，此过程称为采样。 1．正确采样的重要性： 采样是食品分析工作的重要环节。同一种类的食品成品或原料，由于品种产地，成熟期，加工和保藏条件不同，其成分及含量也可能有较大差异。同一分析对象，不同部位的成分和含量也可能有较大差异。从大量的，成分不均匀的，所含成分不一致的被检物质种采集能代表全部被检物质的分析样品，必须科学的采样技术，以防止成分的逸散和被污染的情况下，均衡地采集有代表性的样品，否则，即使后期检测等环节非常精密，准确，其检测结果也毫无价值。

影响微生物发酵能否成功的因素有1、是菌种的选取。2、是菌体浓度的控制。3、是基质的控制，包括碳源、氮源和磷酸盐的量的控制。4、是溶氧量的控制。5、酸碱度的控制。下面是微生物发酵过程的一篇文章，希望对你有帮助！

微生物实验室如果从事致病菌检测、培养基质控验收、方法验证等相关工作，就应该备有质控菌株。实验室需对使用的质控菌株进行规范性管理，以便有效地、安全地使用，保证实验结果的准确性。 　　首先、实验室应制定菌种管理制度 　　内容包括菌种申购、保管、领用、使用、传代、存储等方面的内容，质控菌种申购应由专人申购，保管由专人双人双锁管理，领用及使用应填写记录，使用时应对菌种进行纯度及生化特性进行菌种核查验证并记录，存储应有专门的冰箱、超低温冰箱进行存储，使用完的菌株应按要求销毁处理。

(1)如果稀释度大的平板上菌落数反比稀释度小的平板上菌落数高，则系检验工作中发生的差错，属实验室事故。此外，也可能因抑菌剂混入样品中所致，均不可用作检样计数报告的依据。 　　(2)如果平板上出现链状菌落，菌落之间没有明显的界限，这是在琼脂与检样混合时，一个细菌块被分散所造成。一条链作为一个菌落计，如有来源不同的几条链，每条链作为一个菌落计，不要把链上生长的各个菌落分开来数。此外，如皿内琼脂凝固后未及时进行培养而遭受昆虫侵入，在昆虫爬过的地方也会出现链状菌落，也不应分开来数。

分离培养微生物，离不开固体培养基。在微生物实验室里，固体培养基的使用是如此地频繁和常规，以至于这一方法看起来也理所当然。然而，回溯至1881年固体培养基出现以前，微生物的培养还只能在液体培养基中进行。为了能直接观察培养物的形态及生长情况，科学家希望能将微生物培养在固体表面上，就像微生物生长在橘子皮或土豆上一样。德国医生罗伯特·科赫（Robert·Koch，1843—1910）曾用煮沸消毒的土豆来培养细菌。此后，他试着用明胶作培养基的凝固剂。他将明胶加入液体培养基中进行融化，然后将混合均匀的液体缓慢地倒在一块玻璃板的表面。当明胶冷却凝固后，就在玻璃板表面形成一层固体培养基。为了防止空气中杂菌的污染，科赫还用玻璃罩将玻璃板与周围环境隔离开来。但是，人们很快发现，明胶在20 ℃以上就变软了，很难进行分离微生物的划线操作。在温度高于25 ℃时，明胶就液化了，而大多数细菌的培养温度都不低于25 ℃。