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标准物质是保证准确量值和量值溯源的计量标准，它广泛应用于校准测量仪器、评价测量方法、赋予材料特性量值。在质量管理、质量保证、技术仲裁等方面起着重要作用。

Western Blot是生物修炼的一大实验，现在不做定量Western Blot，都不敢自诩学霸的了，暗暗擦汗的有没有？在讨论如何从Western Blot中获得定量数据之前，先定义一下我们所说的“定量”是什么意思是非常有用的，何为定量，必须符合下列准则：

Catalogue No.: C036 Product Format: one storage tube Culture Properties：贴壁 Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Catalogue No.: C026 Product Format: one storage tube Culture Properties：贴壁 Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Catalogue No.: C1292 Product Format: one storage tube Culture Properties：贴壁 Complete Growth Medium: 89%H-DMEM+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Catalogue No.: C340 Product Format: one storage tube Culture Properties：贴壁 Complete Growth Medium: 89%1640+10%FBS+1%双抗 Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% Application: Cells and cancer research NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

磷酸化和非磷酸化的抗体主要区别有： 　　1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态（磷酸化）的蛋白。 　　2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计，是一种位点特异性的多抗，这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成（多抗）：原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。 　　4.磷酸化抗体合成：人工合成含磷酸化位点的多肽-〉人工体外磷酸化-〉链接半抗原-〉免疫动物-〉收获抗体。

菌落总数检测 1、为什么平板计数琼脂需要调节pH？ 由于大部分细菌是嗜中性的，培养基为符合细菌生长要求，需要调节pH至7.0±0.2，尽量保证较适宜的环境，确保检测结果的准确性。 2、如何保证检测结果的有效性？ 设计空白对照 （1）检验过程中需要做空白对照，用来判断培养基、稀释液、平皿或吸管是否存在污染，完美的空白试验平板上应该无细菌生长。

生物安全长期存在于人类发展的历史长河中。无论是疯牛病、埃博拉、新冠等重大疫情给我们带来的健康威胁，还是一场非洲猪瘟对肉价和市场供应的影响，亦或于20世纪战争中出现的细菌战，都与生物安全息息相关。 生物安全是国家安全的重要组成部分，其中实验室生物安全是生物安全的重要内容之一，是从事检验工作的相关机构或单位实行实验室管理的重中之重。

BJ5183是一种具有较高重组活力的大肠杆菌菌株，是目前腺病毒系统最常用的感受态细胞。BJ5183菌株含有sbcBC recBC双重突变，赋予BJ5183细胞较强的重组能力，有利于转入的目的基因与腺病毒质粒{pAdeasy-1[encodes the Adenovirus-5 genome (E1/E3 deleted)]或pAdeasy-2[encodes the Adenovirus-5 genome (E1/E3/E4 deleted)]}的重组。endA1（缺失核酸内切酶）的突变有利于重组DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。Strr 赋予BJ5183菌株链霉素抗性。BJ5183感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>5×108 cfu/μg DNA。

真核生物DNA存在较多“十字型” 、“Z字型” 等二级或三级结构，这种DNA结构在利用传统大肠杆菌进行克隆时易被大肠杆菌体内的重组酶系统或其他防御系统识别并对其进行重组，删除等破坏，导致很难对这类DNA进行正确的克隆操作。CMbio SURE菌株可以解决这些问题：此菌株体内重组酶系统整条通路被破坏，并且(McrA-, McrCB-, McrF-, Mrr-, HsdR-) 这些限制性突变的存在赋予此菌株无法对外源DNA进行标记、限制的能力，提高了外源甲基化DNA的克隆效率，同时具有核酸酶(endA)突变、重组酶 (recB recJ)突变，增强了外源DNA的稳定性。存在于F´因子上的lacIqZΔM15基因使此菌株可以进行蓝白斑筛选；Kanr，Tetr赋予菌株卡那霉素和四环素抗性。CMbio High5TM系列SURE感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达5×108cfu/μg。

CMbio High5TM系列DH10B感受态细胞只能用于电击转化而不能用于热激转化。CMbio DH10B菌株来源于MC1061菌株，mcrA、mcrBC及mrr突变使DH10B菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA (无论真核生物还是原核生物的基因组DNA都能被高效的转入DH10B中)。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。φ80dlacZ∆M15标记的存在使DH10B可用于蓝白斑筛选，rpsL赋予其链霉素抗性。CMbio High5TM系列 DH10B感受态细胞适用于大质粒的构建或者各种文库构建。CMbio High5TM系列DH10B感受态细胞经特殊工艺制作，经 pUC19质粒检测，转化效率>1010cfu/μg。

Rosetta-gami 2(DE3) 菌株集合了Rosetta 2 和 Origami 2 两种菌株的优点： ＊ pRARE2赋予其Rosetta2菌株的优点——补充大肠杆菌缺乏的7种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA和CGG)对应的tRNA，提高外源基因的表达水平。 --＊ gor522::Tn10 trxB赋予其Origami2菌株的优点——突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase) (trxB)和谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase) (gor)基因，它们是还原途径的两个关键酶，其突变有利于高效形成正确折叠的含有二硫键的蛋白，增强蛋白的可溶性；同时该菌株不具有卡那霉素抗性，可用于具有卡那霉素抗性质粒的蛋白表达。-- ＊ 该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区 (DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶)适合T7启动子诱导的蛋白表达。 ＊ --Rosetta-gamiB(DE3)菌株具有氯霉素，链霉素，四环素抗性，由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率高达108 cfu/μg DNA。

XL10-Gold是目前转化效率最高的感受态细胞，由Stratagene开发的特异性用于大质粒或珍贵连接产物转化或构建文库的超级感受态细胞。XL10-Gold菌株为Hte(high transformation efficiency)基因型，Hte是Stratagene开发的特异性提高感受态转化效率及大质粒转化能力的宿主菌基因型，已成功应用于40kd质粒的构建。[Δ(mcrA)183 Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173]赋予XL10-Gold缺失几乎所有已知的限制酶切系统；同时缺失核酸内切酶(endA)，提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性；Tetr， Camr赋予菌株四环素和氯霉素抗性；lacIqZΔM15的存在使XL10-Gold可用于蓝、白斑筛选。High5TM系列XL10-Gold感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率>2×109cfu/μg。 

 BL21（DE3）感受态细胞用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。 λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，该区整合于BL21的染色体上，所以称为BL21(DE3)。可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。 BL21（DE3） 感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达107cfu/μg。

BL21(DE3)pLysS 感受态细胞携带 pLysS质粒，具有氯霉素抗性。 pLysS含有表达 T7 溶菌酶的基因，T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达，适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。 该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区（DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶）， BL21(DE3)pLysS 感受态细胞由特殊工艺制作经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。

BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株来源于Stratagene公司的BL21-Gold 菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，从而减少对重组蛋白的降解，补充大肠杆菌缺乏的4种稀有密码子( AGA、AUA、CCC、CUA) 对应的tRNA （argU、ileY、proL、leuW），提高外源基因，尤其是富含AT-或 GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。 该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区（DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶），可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达，同时具有四环素，氯霉素，链霉素，壮观霉素抗性。 BL21- Codon Plus(DE3)-RIPL 感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。

 OrigamiB(DE3)感受态细胞包含突变的硫氧还蛋白还原酶（thioredoxin reductase）(trxB) 和谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase)(gor)基因，表达主要还原途径的两个关键酶。有利于形成正确折叠的含有二硫键的蛋白，增强蛋白的可溶性。  该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区（DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶），可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达，具有卡那霉素和四环素抗性，不能用于具有卡那霉素抗性质粒的表达。 OrigamiB (DE3) 感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg。

High5TM系列Rosetta-gami(DE3)pLysS 菌株聚合了不同原核表达菌株的优势： ＊ Rosetta-gami赋予其 Rosetta和Origami的优点——补充大肠杆菌缺乏的6 种稀有密码子(AUA， AGG， AGA， CUA，CCC， GGA) 对应的tRNA，提高外源基因的表达水平，并且包含突变的硫氧还蛋白还原酶（thioredoxin reductase）(trxB) 和谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase)(gor)基因，表达主要还原途径的两个关键酶。有利于形成正确折叠的含有二硫键的蛋白，增强蛋白的可溶性。 ＊ 该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区（DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶），适合T7启动子诱导的蛋白表达。 ＊ 该菌株携带的pLysS质粒含有表达 T7 溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG诱导的表达，适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。Rosetta-gami(DE3)pLysS 菌株具有卡那霉素，氯霉素，链霉素，四环素抗性，经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。

High5TM系列 TB1感受态细胞来源于JM 83，是JM 83 hsdR型，只含有大肠杆菌RNA polymerase，缺少 BL21 (DE3)菌株的 T7 RNA polymerase，适合NEB公司的pMAL 系列质粒原核蛋白表达(The pMAL  vectors use the E. coli RNA polymerase)，不能用于pET系列质粒的表达，具有链霉素抗性。 High5TM系列TB1感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。